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POCT主要技术及临床应用
发布时间:2014-04-19   点击:

  (一)主要技术

  1、简单显色(干化学法测定)技术

  将多种反应试剂干燥、固定在纸片上,加上检验标本(全血、血清、血浆、尿液等)后产生颜色反应,用肉眼观察定性或仪器检测(半定量)。

  2、多层涂膜(干化学法测定)技术

  多层涂膜技术是从感光胶片制作技术移植而来的。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,用仪器检测,可以准确定量。

  3、免疫金标记技术

  胶体金颗粒具有高电子密度的特性,金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的标记处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,这一反应可以通过银颗粒的沉积被放大。该类技术主要有斑点免疫渗滤法(DIGFA)和免疫层析法(ICA)。

  4、免疫荧光技术

  通过检测板条上激光激发的荧光,定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。检测系统通常由荧光读数仪和检测板组成。检测板多用层析法,分析物在移动的过程中形成免疫复合物,通过检测区域、质控区域的荧光信号值的不同与分析物的不同浓度成一定的比例,获得定标曲线,可检测未知样本中分析物的浓度。

  5、生物传感器技术

  利用离子选择电极,底物特异性电极,电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。该类技术是酶化学、免疫化学、电化学与计算机技术结合的产物。

  6、生物芯片技术

  生物芯片是最新发展起来的新技术。其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。生物芯片可分基因芯片、蛋白质芯片和细胞芯片。它们具有高灵敏度、分析时间短、能同时检测的项目多等特点。

  7、红外和远红外分光光度技术

  此类技术常用于经皮检测仪器,用于检测血液中血红蛋白、胆红素、葡萄糖等成分。这类床边检验仪器可连续监测病人血液中的目的成分,无需抽血,可避免抽血可能引起的交叉感染和血液标本的污染,降低每次检验的成本和缩短报告时间。

  (二)临床应用

  1.心脏标志物

  POCT可检测多种心脏标志物,如肌钙蛋白(cTn)、肌红蛋白(MY0)、肌酸激酶同工酶(CK—MB)、B型脑钠肽(BNP)、N末端前脑钠肽(NTerminalPronatriuretic Peptide,NT-ProBNP)、超敏C反应蛋白(hsCRP)等,对心肌梗塞、心衰的早期诊断有重要意义。因为使用POCT方式检测这些指标能缩短心脏标志物的检测周转时间(TurnaroundTime,TAT),对于临床早期诊断和早期治疗有重要意义。因此,心脏科专家强烈建议,开展心脏标志物POCT检测时,检测的TAT应小于30 min。

  急性冠状动脉综合症(ACS)是临床危急症之一,由ACS或其他原因引起的心肌损伤患者进行心肌损伤标志物检测时,POCT应作为首选。在2007年美国NACB医疗实践指南中,对ACS心脏标志物的POCT监测和管理提出了一系列指导性建议,其中包括早期及时检测cTn、CK—MB来早期诊断ACS。对社区医院心内科的研究表明,POCT检测cTn显著缩短了TAT,赢得了对急诊重症患者的治疗决策时间。急诊患者的入院前处理关系到患者的抢救与恢复,在救护车上利用美国Abbott公司生产的i-STAT设备对心肌梗死病人测定cTn,能显著缩短TAT时问,使其从传统院内检测所需的44 rain缩短至12 min。

  除了心脏损伤的指标可以用POCT方式检测外,一些用于心血管疾病的危险分层、预后评估和治疗监测的指标也能用POCT实现快速检测。例如,对于呼吸困难患者,检测血浆BNP或NT—proBNP有助于心源性和非心源性呼吸困难的鉴别诊断,血浆BNP或NT—proBNP浓度不高特别有助于排除左心收缩功能不全。当前,BNP或NT—proBNP的POCT检测结果与常规实验室测定的结果具有良好的可比性。值得一提的是,BNP/NT—proBNP的用途体现在多个方面,除了疑似心衰的评估外,还可用于心衰的危险分层,稳定型冠状动脉疾病的风险分层,肺动脉高压的危险分层,指导心衰的治疗,筛查高危人群的左心室功能失常等。如果使用POCT检测方式,不仅能在30 min至60 min内得出结果,还能对后续的治疗工作做好积极的铺垫,急诊科与心脏科医生对此都十分欢迎。

  2、临床化学

  POCT在临床化学检测方面的应用范围基本包含了常规生化分析仪可以检测的项目,如电解质、肝功能、肾功能、脂类、血气等,这对制定患者的诊疗措施有重要作用。

  血葡萄糖浓度,从便携式血糖仪到整合的生化POCT分析仪都能快速检测,尽管使用的反应原理不尽相同,但都能保证结果在临床允许的范围之内。使用POCT设备检测血糖,可以不苛求使用血清样品,很多仪器都适合使用血浆或全血样品,这样就能做到样品采集后立刻检测,节省了等待凝血和离心处理的时间;使用POCT设备一般能在数分钟内得出结果,但POCT血糖检测需注意使用过程中的定期与参考方法进行比对、评价,平时做好质量控制。

  电解质、血气分析可以经POCT设备的整合,在一次采血后即刻完成检测。美国IL公司的GEMPremier3000血气分析仪和Abbott公司的i-STAT掌上分析仪都能做到。通过选择恰当的试剂包可以满足临床医生不同的检测需求,既降低了成本,又使患者减少了多次采血的痛苦。临床评价表明i—STAT床旁分析仪适合开展电解质、血气等指标的检测。其局限性在于检测高氧分压时有显著的偏倚。

  此外,胆红素、糖化血红蛋白、肌酐、胆固醇、三酰甘油也可以通过POCT方式快速检测,为临床医生快速提供参考结果。当然,随着大型生化分析仪的飞速发展,TAT时间也在不断缩短,如果常规实验室也能快速完成临床化学指标的检测,我们就不必要每个项目都使用POCT方式来完成检测,按需应用是较好的选择。

  3、抗凝治疗

  常规凝血功能指标如PT、APTT、Fib、INR、血小板功能、D二聚体都能使用POCT设备检测。一方面能为急诊手术患者节省时间,另一方面能使长期抗凝治疗患者得到便捷的监测服务。一项多中心研究表明,使用POCT设备(如CoaguChek ProDM)与常规实验室检测的凝血功能指标相比,二者有很好的相关性、一致性,而且POCT方式只需不到5 min完成检测,而常规实验室需要平均88 min,其优势显而易见。

  有了便捷的检测设备,抗凝治疗的患者就能在家中自我检测INR值,就像检测血糖浓度一样方便。最近的研究表明,67例换瓣手术后患者使用POCT自我监测的INR与常规实验室检测结果相比,POCT方式能保证患者的INR处于更好的稳定

  状态,从而降低了发生严重出血的风险。但POCT应用于凝血检测尤其要注意做好质量控制,通常可用的手段包括室内质控、室间质评、分割样品法比对等。

  4、临床常规检验

  在常规检查中,尿液干化学检查、粪便隐血检查等简单的项目本身就是利用了床旁检测的技术,方便快速。血常规检查中的部分指标也可以应用POCT,如血红蛋白、红细胞比积测定,它们可以在整合的一体化分析仪如i-STAT中完成,也可以通过单独的小型设备完成测定。很多医院利用床旁血气分析仪测定血红蛋白和红细胞比积,这对于手术后患者的监测尤其重要。通过简单的床旁检测,可初步判断患者是否需要及时输血治疗。但有文献报道,在红细胞比积小于30%时血气分析仪测定的结果并不可靠,原因是方法学原理的差异。因此在使用POCT设备时应对其局限性加以注意。

  5、微生物学

  POCT在微生物学检测中的应用主要是快速检出某些病原菌。美国NACB感染性疾病应用指南总结了当前使用POCT检测微生物指标的情况。POCT对A群链球菌的检出是快速有效的,与临床资料相符。目前已开始使用分子检测手段对B群链球菌进行筛查,但是还不太适合广泛开展POCT检测。对幽门螺杆菌可以采用POCT方式进行快速检测,其敏感度和特异度均较高。发生社区流行性流感病毒时,可使用相应的POCT仪器和试剂完成检测,但需注意阴性结果不能排除流感病毒感染。另外,使用POCT方式检测艾滋病病毒(HIV)能达到与常规实验室酶联免疫法测定相当的敏感度和特异性,因此强烈建议在高危人群中使用这种快速手段筛查HIV,降低HIV在人群中的传播率。

  在微生物学领域应用POCT方式检测病原菌,只是快速方便的一种手段,并非鉴定病原菌的金标准.通常需要依靠培养来确诊。因此,我们不能盲目相信POCT的检测结果,需要结合临床表现来综合分析。

  6、家庭保健

  经过简单培训的非医学专业人员完成POCT操作,在家庭保健中发挥着积极作用。如糖尿病患者通过掌上血糖仪在家中自测血糖浓度,口服抗凝药的患者自查INR,育龄妇女通过简单的试纸条自查尿hCG、LH,推算排卵期等等。对非专业人士应用POCT,更应该强调质量控制,保证试剂在有效期内,仪器工作状态良好,还应定期到医院检验科复查和比对。